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浅议验证酶联免疫法HBsAg抗HCV假阳性存在的误区

发布人:系统管理员  发布日期:2017-11-01  点击:

郭明卫1,卢淑兰2,冯实2,刘斌2

(1.      河北省沙河市人民医院检验科,河北沙河054100

(2.      河北省荣军医院检验科,    河北保定071000

摘要:目的 探讨验证酶联免疫法HBsAg和抗HCV假阳性存在的误区。方法 选取有关酶联免疫法检测HBsAgHCV假阳性的报道,对其验证方法进行分析。结果 应用胶体金检测方法验证酶联免疫法HBsAg假阳性和应用HBV-DNA阴性验证HBsAg阴性均不适用。结论 检测HBsAg和抗HCV可以使用血清或血浆,但建议使用不抗凝血液标本。

关键词:验证;酶联免疫法;HBsAg和抗HCV;假阳性

临床上检测HBsAgHCV的常用方法为酶联免疫法,但在工作中可能遇到检测结果为假阳性的问题,如何验证HBsAgHCV假阳性,保证检验结果的准确性,笔者认为可能产生以下误区:

1应用胶体金检测方法验证酶联免疫法HBsAg假阳性

据乔秀真等报道[1],“应用北京万泰生物药业股份有限公司提供的HBV检测试剂盒用于酶联免疫法检测,结果显示:HBsAg+)、HBsAb-HBeAg-)、HBeAb-)和HBcAb-)。……同时应用胶体金快速法检测HBVHBsAg为(-)”。以此方法作为验证HBsAg假阳性的方法之一不适用。

酶联免疫法是目前检测HBsAg的主要方法,具有高度的特异性和灵敏性,胶体金简便快速,广泛用于临床对HBsAg的初筛、急诊和无偿献血的现场筛查。但由于胶体金显色需要较高浓度的标记物,其灵敏度会受到一定的限制,在HBsAg浓度较低时会出现假阴性[2],而导致低滴度HBsAg感染者的漏检。所以应用胶体金检测方法验证酶联免疫法HBsAg不适用。

2应用HBV-DNA阴性验证HBsAg阴性

据乔秀真等报道[1],……初步确定HBsAg+)问题出现在酶联免疫法应用肝素锂方面,即对患者标本进一步进行HBV-DNA检测,并未检测到HBV-DNA”。那么,HBV-DNA阴性的标本能验证HBsAg一定阴性吗?据报道[3],4例定量检测HBsAg+)的献血者均为HBV-DNA阴性,且HBsAg<5 IU/mL,含量微量”,而“大三阳”为何出现HBV-DNA阴性[4]也同时说明了HBV-DNA阴性并非HBsAg完全阴性。

检测HBsAg可以使用血清或血浆,但肝素抗凝剂可能会偶尔影响ELISA检测导致假阳性,建议使用不抗凝血液标本;检测抗HCV可以使用血清或血浆,EDTA、草酸、肝素均可抗凝使用;但建议使用不抗凝血液标本[5]。如果应用静脉血肝素锂抗凝血浆检测HBsAg和抗HCV,结果可能出现假阳性,其可能原因为血浆中纤维蛋白原和酶结合物一起易黏附到ELISA检测板上,不易洗掉,可造成假阳性[6],而应用静脉血促凝血清检测出现假阳性可能为其他原因所致[7]

参考文献

[1]乔秀真,艾冬梅,郭九玲,等.酶联免疫法临床检测中假阳性现象分析[J].国际检验医学杂志,20173819):2795-2797

[2]李伶俐.孙俊聪400例乙肝表面抗原胶体金试条法与ELESA法检测结果分析[J].中国医学创新,2011828):35-36

[3]周豪杰,里然,游冉冉,等.乙肝表面抗原阴性而核酸阳性献血者血液安全性评估[J].包头医学院学报,2017337):4-21

[5]赵建宏,戴二黑,张振国,.医学检验标本留取及收集指南[M].北京:中国科学技术出版

[5]顾兵,张晓宁,黄朝晖,等.临床检验结果案例分析[M].长沙:中南大学出版社,2017100-101

[6]尚红,王疏三,申子瑜.全国临床临床操作规程[M]4版.北京:人民卫生出版社,2015444

[7]周晔,张莉.分析和处理ELISA法检测乙肝表面抗原产生"假阳性[J].实用医技杂志,20081510):3866-3867

[8]谭立明.ELESA检测的影响因素及其对策[J].实验与检验医学,2013314):300-305